| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 4. Химический форум ... |
 |
анализ количественного содержания фосфолипидов и нейтральных липидов в эритроцитах, сыворотке и печени крыс >>>
|
 |
| Автор | Тема: анализ количественного содержания фосфолипидов и нейтральных липидов в эритроцитах, сыворотке и печени крыс |
|
ecochem Пользователь Ранг: 4 |
 21.03.2012 // 12:46:25
Коллеги есть ворос. В задачах исследования стоит анализ количественного содержания фосфолипидов и нейтральных липидов в эритроцитах, сыворотке и печени крыс. Большая просьба, может быть кто-то работал с этим объектом. В чем особенности по экстракции, очистке, системах растворителей по ТСХ. Методика по человеку есть, но не смотря на то что крыса - млекопитающее, могут быть специфичные компоненты которые мешают хроматографическому разделению фракций. Так в первых опытах нейтральные и фосфолипиды тянуться полоской. Может быть кто-то это делал и может подсказать? Заранее спасибо. |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
21.03.2012 // 16:25:10
Экстракция однозначно смесью Фолча, затем промывка 0,74 % хлоридом калия и упаривание , желательно в токе азота или в вакууме, чтобы предотвратить окисление липидов. Далее по ТСХ. Для нейтральных липидов н-гексан : диэтиловый эфир:СН3СООН 35:15:1. Для фосфолипидов рекомендую сначала пластинку импрегнировать борной кислотой (смочить в 4 % растворе борной кислоты в этаноле, а затем высушить и активировать в сушильном шкафу как обычно). ПФ хлороформ : метанол : вода (50:40:4), можно попробовать и стандартную хлороформ : метанол : вода (65:34:1).- зависит от пластинок. Первая подходит для Сорбфилов, вторая для Мерка и Силуфола. Проявитель: 10 % фосфорно-молибденовая кислота в этаноле Условия проявления: прогрев при 120 С в течение 15 мин. Я раствором не опрыскиваю, а окунаю в раствор на пару секунд, и высушиваю феном. Есть такая технология dipping, чтобы можно было получить нормальные количественные результаты. Иначе все будет "в дырочку", если пульверизатором |
|
ecochem Пользователь Ранг: 4 |
22.03.2012 // 10:59:44
Большое спасибо коллега! Чувствуется что вы как говорится "в теме" и занимаетесь этим давно. Эти условия вы пробовали на крысах? Если не секрет в каком заведении работаете? Мы аспиранты Курского госмедуниверситета кафедры биологии, медицинской генетики и экологии. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 2 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
