| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Помогите с методикой для трипсинолиза! >>>
|
 |
| Автор | Тема: Помогите с методикой для трипсинолиза! |
|
olga83 Пользователь Ранг: 2 |
 17.10.2011 // 16:57:11
Добрый день! Не могли бы вы подсказать методику трипсинолиза. Необходимо провести трипсинолиз модельной смеси белков (БСА и бета-лактоглобулин) с последующим анализом на MALDI. Спасибо! |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
AA_Alex Пользователь Ранг: 372 |
17.10.2011 // 17:42:52
Спросите, лучше, на Молбиоле |
|
Spectrometrist Пользователь Ранг: 777 |
18.10.2011 // 21:58:21
Редактировано 1 раз(а) Да ненужно там никаких методик: возьмите белки, скажем 1 мг/мл в 25 ммоль бикарбонате аммония, добавьте трипсин 1:10 (энзим / белок; по весу), капните микролитр смеси на бумажку индикаторную, убедитесь там рН выше 7.5 (на всякий пожарный случай), поставьте на 37 С на ночь и будет вам счастье. Если это все чтобы просто получить пептидную карту (и не драться за coverage), на восстановление / алкилирование можете забить, и так полно пептидов будет. Потом возьмете аликвотку в скажем, микролитр, разбавите 0.1 трифторуксусной или 1% формиком раз в 10 чтоб МАЛДИ не убить, посмотрите рН чтоб кислая была, и мешаите смело с матрицей / наносите на матрицу, смотря какой способ вашему сердцу милее - thin layer or dry droplet И все! |
|
olga83 Пользователь Ранг: 2 |
19.10.2011 // 16:57:39
Спасибо огромное!!! Будем пробовать. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 3 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
