| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Странная форма пика на ГХ-МС. >>>
|
 |
| Автор | Тема: Странная форма пика на ГХ-МС. | |||||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
 20.06.2011 // 16:18:05
Редактировано 1 раз(а) Добрый день! Столкнулся вот с какой проблемой - пик олеиновой кислоты выходит с "бугорком".. но это однозначно не цис-вакценовая, так как ее пик следует далее и разделение очень хорошее: - общий вид хроматограммы: img103.imagevenue.com/img.php?image=857227425_1308572274_122_948lo.jpg - увеличенная область с пиками олеиновой - х (RT 22.300) - цис-вакценовой кислотами: img238.imagevenue.com/img.php?image=572330650_1308572330_122_394lo.jpg Данная картинка наблюдается в двукратной биологической повторности и 6 кратной аналитической, причем, схожая ситуация, правда при отсутствии пика вакценовой кислоты, отмечена и для другого вида исследуемого объекта. Что это может быть? NIST утверждает, что это - 6-18:1, но такого быть не может - она бы вышла раньше олеиновой... Можно ли как-то попробовать добиться лучшего разделения? Исходные файлы: files.mail.ru/J63GWH Условия анализа: DB-23, 60 м, He 1 мл\мин, делитель потока – 1:20; начальная температура колонки – 130°С. Программа градиента температуры колонки: от 130°С до 170°С со скоростью 6.5°С/мин, от 170°С до 215°С со скоростью 2.75°С/мин, выдержка при 215°С в течение 25 мин, от 215°С до 240°С со скоростью 40°С/мин и выдержка при 240°С в течение 50 мин. Температура испарителя – 260°С. Рабочая температура МС-детектора – 240°С. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2133 |
20.06.2011 // 17:40:22
Редактировано 1 раз(а) 1. Если сделать добавку олеиновой кислоты в сэмпл (соотв. без олеиновой кислоты) и.., то ситуация та же? 2. Ну, NIST сам по себе ничего не "говорит", плюс многое зависит от качества самого масс-спектра, параметров поиска и т.д. В данной ситуации получить качественный масс-спектр очень сложно, ввиду сильной интерференции пиков и схожести масс-спектров аналитов, другими словами поиск по библиотеке приведет, с большой вероятностью, к "левым" результатам. 3. Думается, если это не АРТЕФАКТ, то это изомер олеиновой кислоты (двойная связь в другом месте). Можно ли улучшить разрешение? Да. Нужно менять темп. программу термостата колонки, как минимум, плюс, возможно, лин. скорость газа-носителя (в некоторых случаях "катит" градиент об. скорости элюента), и, конечно, уменьшить массу аналитов вводимых в колонку (раза в 2-5). 4. Хочется заметить, что многие "заметные" пики имеют не оптимальную форму, ввиду "перегруза колонки". |
|||||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
20.06.2011 // 18:02:04
Редактировано 1 раз(а) Добавку олеиновой кислоты в сэмпл мы не делаем, в предыдущих пробах и для других видов пик олеиновой без подобного "плеча". В качестве внутреннего стандарта используем маргариновую. Но в данной пробе ее нет, т.е. это просто FAMEs из растительных ТАГ для качественного жирнокислотного состава. Есть подозрение, что это - транс-изомер - они часто возникают при дериватизации и даже на этапах очистки и выделения липидных фракций.. но как его так отделить, чтобы узнать достоверно - пока не знаю ( Видимый "перегруз" колонки - мера вынужденная, компромиссная, чтобы можно было еще и минорные компоненты оценить типа 12:0 или 15:0, докозановой и т.д... Можно, конечно, вколоть без делителя, но как быть тогда с огромными количествами пальмитата или линолеата? ( вот и сошлись на определенной негауссовости пиков.. С природными смесями в этом смысле непросто ( |
|||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2133 |
20.06.2011 // 19:03:09
Редактировано 1 раз(а) 1. Если не делали сэмпл с добавкой олеиновой кислоты, то можно сделать, но надо аналогичную матрицу подобрать без олеиновой кислоты. Этот пункт так же поможет доказать цис>транс. 2. Может и транс-изомер, но то, что изомер - это высоко вероятно. Может в этих сэмплах содержится что-то, что промотирует изомеризацию и т.д. 3. Можно тупо проверить версию цис>транс: взять "голую" (в гексане и т.д.) олеиновую кислоту и т.д. "жестко" - посмотреть будет ли "левый" пик появлятся. Думается, это более простое и надежное доказательство, чем возня с ГХ-МС. 4. Последнее - делить, но даже, если удасться добиться нормального разрешения, надо будет ломать голову над масс-спектром. В общем, понадобиться еще RI и т.д., возможно даже доказательство через предикт RI (путем интерполяции и т.д.), но это все без 100г. или аспирина - тяжко. |
|||||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
20.06.2011 // 19:10:34
Вот это-то и самое тяжкое... Как из природной смеси, где олеиновая и цис-вакценовая кислоты присутствуют почти всегда, их отбросить? (( Я пока склоняюсь к варианту "проигнорировать" данную метастазу - источник с пробой известен в случае чего, всегда можно провести дополнительное исследование в какой-нибудь из долгих зимних вечеров.. М! А если сделать DMOX? Может, они лучше разделятся, чем FAMEs? Да и масс-спектры там проще идентифицировать... не?.. |
|||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2133 |
20.06.2011 // 21:32:42
1. Если не горит, тогда забейте. 2. DMOX: Нужно пробовать, теоретически сложно сказать. Насчет различия масс-спектров цис- и транс-, в общем, ситуация не сильно улучшится. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
20.06.2011 // 22:39:39
virtu, а в каком направлении стоит менять давление-температуру?.. пока жду AMP для синтеза DMOX попробую таким образом разделить - авось выгорит что... на нобель, конечно, не шибко похоже, вероятнее шнобель, но надо проверить... |
|||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2133 |
21.06.2011 // 2:54:20
Редактировано 1 раз(а) 1. Включите фантазию  Начните с темп. (нач. темп., количество и качество изотерм, скорость нагрева и т.д.), затем, если не получится, переходите/подключайте к градиенту давления элюента (1>2-4, 2-4>1 ml/min и т.д.). Да, и старайтесь начинать с самого простого. Простота - залог успеха.Тонкая работа: тут либо творчески, либо математически. Последнее - надежно, но, может быть, скучно. Сильно не увлекайтесь - упирайтесь разумно. 2. DMOX: Все-таки, думаю положительный эффект на Rs должен быть, вопрос насколько - статьи посмотрите, может это уже история. |
|||||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
22.06.2011 // 21:27:55
virtu, спасибо, всё получилось - в изотерме при повышенном давлении разделилось настолько сносно, что даже можно интегрировать ) жить, конечно, от этого легче не стало, ибо теперь надо понять что ж эта за дрянь там и куда девается в процессе созревания плодов.. Но, без пиколиниловыэ эфиров или DMOX это уже не решить... А то NIST по всем трем пикам теперь пишет 9-18:1 ))) Ясно одно - не артефакт и, судя по площади, претендует на роль главной кислоты... |
|||||
|
virtu VIP Member Ранг: 2133 |
22.06.2011 // 22:02:49
Замечательно. Выше уже говорил о проблемах с идентификацией по масс-спектрам в этой ситуации. Боюсь, может даже DMOX и т.д. не поможет и надо будет через ИУ (RI) идти. Масс-спектры совсем идентичные получились? Кстати, я бы все-таки попробовал проверить версию изомеризации олеиновой кислоты цис>транс. |
|||||
|
Chamomillablue Пользователь Ранг: 1302 |
22.06.2011 // 22:14:20
Масс-спектры детально еще не смотрел, но FAMES не очень удобно диагностировать по MS. Есть вариант поделить FAMES препаративно с Ag, и затем сделать DMOX или пиколиниловые - тогда легче будет идентифицировать. Версия транс- положений не исключена, но маловероятна.. в растениях транс-кислоты практически невозможны, а если бы это была ошибка методики, то у нас бы вылезли транс-изомеры и для других ненасыщенных кислот - а этого не наблюдается... В общем, "вскрытие покажет" )) Планируем закупить DB-88 - она должна хорошо делить цис- и транс-, если верить Agilent... |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 10 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
