Российский химико-аналитический портал  химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов  
карта портала ::: расширенный поиск              
 



ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...
  1. Аналитический форум | Список форумов | Войти в систему | Регистрация | Помощь | Последние темы | Поиск

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Плазму крови разводим метанолом, центрифугируем, осаждаем белки, колем в ГХ-МС. Доктор, это опасно? >>>

  Ответов в этой теме: 7

[ Ответ на тему ]


Автор Тема: Плазму крови разводим метанолом, центрифугируем, осаждаем белки, колем в ГХ-МС. Доктор, это опасно?
Dionisii
Пользователь
Ранг: 375

25.04.2011 // 12:38:10     
Столкнулись с проблемами при экстракции вальпроевой кислоты из плазмы крови. Она не вытягивается неполярными растворителями, типа гексана и эфира. Её концентрация в плазме крови очень большая. До 50 мкг/мл. Можно разводить без опасения за чувствительность метода. Вместо экстракции делаем следующее. Плазму крови разводим метанолом 1:10, центрифугируем 13000 rpm, осаждаем белки, супернатант колем напрямую в ГХ-МС (колонка НР-1). Хотелось бы знать, нет ли здесь опасности для колонки. Она неполярная, а в пробе содержится вода - 7-9%.
ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
DSP007
VIP Member
Ранг: 2228


25.04.2011 // 13:29:14     
Редактировано 1 раз(а)

Ну поставьте эту, как ее , предколонку из обломка какой нибудь колонки. Вода HP-1 не страшна, за масс-спектрометр- не ручаюсь. А касательно почему не экстрагируется- дык все сильные органическкие кислоты присутсвуют в организме в виде солей, а вальпроевая вообще сидит на липопротеидах низкой плотности "свесив хвост". Вломите серняшечки или соляночки и будет Вам хорошая экстракция.
Dionisii
Пользователь
Ранг: 375


25.04.2011 // 13:51:28     
Редактировано 1 раз(а)

Подкисляли 1 М Н3РО4 - 50/50, после экстрагировали эфиром, гексаном. Очень низкий % экстракции.
Korvet
Пользователь
Ранг: 1107


25.04.2011 // 18:21:38     
а ионообменная ТФЭ? а может даже и просто ТФЭ...все таки как вы делалаете не надо лучше, дело не в воде, а в сахарах, минеральных веществах, липидах которые все тоже содержаться в пробе, оседая в лайнере и колонке и ухудшая работу всей системы в целом. может 5-10 вколов ещё ничего сделать, но если на постоянку, я бы поискал другой способ пробоподготовки.
Dionisii
Пользователь
Ранг: 375


26.04.2011 // 10:36:03     

Korvet пишет:
а ионообменная ТФЭ? а может даже и просто ТФЭ...все таки как вы делалаете не надо лучше, дело не в воде, а в сахарах, минеральных веществах, липидах которые все тоже содержаться в пробе, оседая в лайнере и колонке и ухудшая работу всей системы в целом. может 5-10 вколов ещё ничего сделать, но если на постоянку, я бы поискал другой способ пробоподготовки.

Спасибо, примерно о таких вещах я и хотел проконсультироваться.
КонстантинС
VIP Member
Ранг: 2306


03.05.2011 // 21:48:30     
Гм... странная получилась методика.. лень смотреть на формулу этой кислоты, но и так ясно, что она прекрасно связывается с белком.. в результате целевое удаляется, а грязь селективно остается
Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246
Аквадистиллятор электрический ДЭ-10 Аквадистиллятор электрический ДЭ-10
Аквадистиллятор ДЭ-10 предназначен для производства дистиллированной воды, отвечающей требованиям действующей Госфармакопеи РФ, путем тепловой перегонки воды, отвечающей требованиям Сан.ПиН2.1.4.559-96. Производительность 10 л/ч.
[ Информация из каталога оборудования ANCHEM.RU ]
Andrew
VIP Member
Ранг: 1322


04.05.2011 // 11:29:46     
Высаливание не пробовали? А еще есть неплохой вариант смешивание крови с безводным сульфатом натрия до сыпучего состояния, а потом - извлечение спиртом изи ацетонитрилом. Подробности не помню, давно было. Так, в качестве идеи. Попробуйте поискать публиказии В.В. Зимнухова. Може о что-нить опубликовал из таких вещей.
КонстантинС
VIP Member
Ранг: 2306


04.05.2011 // 12:13:06     
Редактировано 1 раз(а)

Только не спиртом, а ацетонитрилом для вэжх или эфиром для гх я это примерно и имел в виду, Андрей, только ждал сначала реакции) наверное, еще перед этой процедурой надо все хорошенько закислить .. я бы закислил, дальше эту "сыпучку" сделать, экстрагировать эфиром.. можно экстракт пропустить через силикагель на всякий случай.. и колоть..

  Ответов в этой теме: 7

Ответ на тему



ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU:      [ Все новости ]

ЖУРНАЛ ЛАБОРАТОРИИ ЛИТЕРАТУРА ОБОРУДОВАНИЕ РАБОТА КАЛЕНДАРЬ ФОРУМ

Copyright © 2002-2009
«Аналитика-Мир профессионалов»

Размещение рекламы / Контакты