| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Выделение фосфолипидов из водных проб >>>
|
 |
| Автор | Тема: Выделение фосфолипидов из водных проб |
|
metrim Пользователь Ранг: 646 |
 15.03.2011 // 18:45:11
Пробуем сейчас методику выделения фосфолипидов (PLFA) из почвенных образцов для последующей идентификации их и интерпретации как мармеров таксономического состава почвенной микробиоты. Ничего сильно нового в этом нет. Возникла тут мысля: попытаться адаптировать этот метод для водных проб. При этом сложность состоит в том, что методика пробоотбора предполагает экспедиционные условия, т.е. нужно иметь возможность законсервировать образцы воды на неделю-месяц без наличия холодильника, возможности выпарить, лиофилизировать и пр. Короче нужно найти или сделать какие то "концентрирующие патроны", что бы прокачивать через них 1-2 литра воды, сажать на них PLFA, герметично упаковывать, а уже потом, по возвращении в лабораторию - спокойно экстрагировать, чистить и пр. Совершенно не представляю как подступиться к этому вопросу. Подскажите хотя бы в каком направлении искать, что смотреть. |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
Garry VIP Member Ранг: 1076 |
15.03.2011 // 20:07:41
Либо концентрировать на твердофазных патронах с XAD-2 (7) полимером или на худой конец ТФЭ с С18. Можно прикупить полимерных дисков для ТФЭ для фильтрации через них до 1 л воды. Если ни того ни иного нет возможности приобрести, то запаситесь делительной воронкой и герметичными емкостями с тефлоновыми септами. Ну и ... бутылью с хлороформом или хлористым метиленом. Делов - то, экстрагируете фосфолипиды в хлороформ, отделяете хлороформенный экстракт и сливаете в герметичную емкость. Конечно работа с хлороформом чревата  крепким сном и больной печенью, но если это делать под вытяжкой или на свежем воздухе, то... нормально.
|
|
metrim Пользователь Ранг: 646 |
16.03.2011 // 17:36:35
Garry, спасибо за ответ ТФЭ с С18 в хозяйстве есть. Только вот народ говорил, что это не лучший вариант в таком случае. Мембранные фильтры тоже есть и полимерные и "стеклянные", но вот получится ли на них "посадить", а главное потом "снять" количественно??? С бутылями хлороформа возможности путешествовать вероятно не предвидится. Вообще сейчас ка раз по методике которую пробуем из почвенных образцов в делительной воронке PLFA выгоняют в хлороформ. Просто я все это наблюдаю и понимаю, что возможности организовать такой же процесс в полевых условиях - нет. Вот отобрать объем воды и быстро пропустить через патрон или фильтр, а потом "законсервировать" в малом объеме хлороформа - наверное получится. Собственно определение потом проводится на ГХ, нормировка производится по вводимому в пробу маркеру (не встречающемуся в природных условиях) |
|
petrovich1881 Пользователь Ранг: 17 |
01.09.2011 // 21:46:56
Редактировано 1 раз(а) Как-то пару лет назад смотрел диссер про PLFA биопленки в питьевой воде Там экстракция, но может что-нибудь полезное найдете еще. Для экспедиционных условий навскидку могу предложить стерильные бутылки с заранее налитым хлороформом, только бутылки взять с прижимной керамической пробкой типа из-под пива Grolsch, проавтоклавировать и, если хотите, сменить прокладку под крышкой. Пробы вливать в бутылки (встряхивание в рюкзаке осуществляется автоматически!), а по возвращении довести экстракцию до конца. |
|
metrim Пользователь Ранг: 646 |
04.09.2011 // 22:23:00
Благодарствую! Ну уж такие изыски - скорее всего излишни. Вроде как и полипропилен - вполне адекватно держит хлороформ время необходимое для транспортировки. Во всяком случае пробовали оставлять экстрагирующую смесь со стандартами в фальконах (50мл) , а потом прогоняли её через всю пробоподготовку и существенных погрешностей от пластика замечено не было. Хотя конечно это был лишь прикидочный тест и со 100% уверенностью - говорить сложно. |
|
petrovich1881 Пользователь Ранг: 17 |
07.09.2011 // 22:59:01
Такой вариант кажется вполне ок, особенно если все ёмкости будут из одной партии, чтобы убрать влияние примесей - шиш его знает, что там может экстрагироваться из полипропилена. Только что пришло в голову воспоминание насчет обращеннофазовых картриджей Alltech IC-RP. Что если прокачивать через них вашу прудовую предфильтрованную воду, а дома уже отмывать хлороформом севшую на полистирол органику? |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 5 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
