| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
ВЭЖХ: регенерация (восстановление) колонки Varian Pirsut 3 C18 150*1 >>>
|
 |
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
 19.03.2010 // 0:54:29
Редактировано 2 раз(а) Ну, на чужую беду советовать - не на свою  не думаю, что сервис-инженер свою бы собственную обращенную колонку в гексан запустил максимум 20-30% хлороформа иди ДХМ в ацетонитриле.. или что-то с ТГФ.. но уж никак не гексан..А по поводу колонки не переживайте.. во-первых, халява.. во-вторых, даже новенькие колонки с 1 мм диаметром - не шик-модерн.. обычно эффективность у них невысокая сама по себе.. еще ж не забывайте что под нее нужна специальная маленькая кювета и желательно микроборный специальный инжектор.. иначе бешенное размывание и жуткие хвосты.. и удельное сопротивление у них высоковато.. .. и еще подозрение на то, что она убитая.. вобщем - семь бед - один ответ ..лучше выбить деньги на одну дорогую новую, и потом бережно-бережно ее хранить.. никого гексана и никакой теплой зеленой водички на фосфатном буфере в теплые летние деньки ..и замечательный у Вас файлообменник - "секс после первой переписки" 
|
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
aleksey_ksk Пользователь Ранг: 22 |
 19.03.2010 // 11:17:34
Как раз хотел погонять его на 1-2 мм колонке, но все свои 4.6, дополнительно, с целью выяснить как сильно мертвый объем и ячейка будут влиять на пики и есть ли смысл переходить на них, менять каналы, петлю самплера. Производитель пишет, что ячейка достаточно мелкая, не UPLC канеш но... Стоил ли оно того??? Все же экономия растворителей, пробы и...мне, для контроля фарм препаратов не требуется анализировать смеси более 3х-5 веществ и определение минимальных концентраций. И еще мучил вопрос. Вода гналась через милексы 0.22 микронники, что должно исключать бактерии. Соли никакие не гоняли только кислота и АЦН. Не верилось что бактерии так злобны))) файлообменник поисковик выдал)-терь разобрасля че к чему)) |
|||||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1314 |
19.03.2010 // 11:59:46
Редактировано 5 раз(а) Присоединяюсь, не переживайте. По поводу зарастания микробами - этот вывод ни на чем не основан. Конечно, мыть обращенку гекесаном - плохой стиль. Совет в этой ситуации: градиентом при 1/4 от рабочего потока перейдите от гексана к i-PrOH. Мойте колонку i-PrOH ~200 объемов колонки. Затем градиентом при 1/4 от рабочего потока перейдите от i-PrOH к ACN. Успехов! Очевидно у Вас действительно происходит разбавление пробы. Для работы с такой колонкой нужно минимизировать жидкостные объемы от петли до ячейки детектора, последняя должна быть 1-3мкл, не более. |
|||||
|
aleksey_ksk Пользователь Ранг: 22 |
19.03.2010 // 13:51:37
Всю ночь стояла на i-PrOH Утром после уравновешивания Ме/ACN 
|
|||||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1314 |
19.03.2010 // 14:01:45
Продолжайде мыть дальше. Смыть гексан с обратной фазы не простое дело... |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
aleksey_ksk Пользователь Ранг: 22 |
19.03.2010 // 14:08:42
Это опять тот же фипронил. А объемы минимизирую скорее всего, петлю точно сменю, (100мкл стандарт стоит), колонки 3-2 мм скорее всего буду ставить |
|||||
|
Волгин VIP Member Ранг: 1326 |
19.03.2010 // 16:31:54
Вот это - правильно!
|
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
19.03.2010 // 18:30:32
Редактировано 2 раз(а) Все же экономия растворителей, пробы и...мне, для контроля фарм препаратов не требуется анализировать смеси более 3х-5 веществ и определение минимальных концентраций. Ну, здесь Вам никаких микроколонок совершенно не требуется. Значительно больший эффект принесет соблюдение нехитрых правил работы. ВЭЖХ отличается тем, что здесь значительно удобнее работать в изократическом режиме. А если работаешь в изократике, то элюент тратится только при замене элюента или колонки. И уж совсем все становится удобно, если элюент не содержит неорганических солей и рН не слишком низкий (не менее 2.5). Тогда в конце дня колонку можно просто оставлять под элюентом. Удобство становится просто феноменальным, если под несколько разделений получается приспособить элюент одного состава. То есть, приготовил кубиков 200-300 элюента (очень мало - тоже плохо), профильтровал и дегазнул, откондиционировал колонку - и на рецикл (т.е. выход из детектора - в посудинку с элюентом). И это миф, что "чего-то мешает".. все отлично, на изократике ничего не мешает.. главное - чтобы растворитель изначально был чистенький (ну, и реагенты, если есть).. помню, я и по месяцу, и по два цедил 300 мл элюента. И работал на 210 нм - без проблем. Одним словом, в изократике не имеет значение какого диаметра колонка - с точки зрения экономии. Все решает другие факторы: насколько хорошо одна колонка справляется с максимумом анализов, насколько оптимально подобран состав элюента, чтобы выполнялись максимум анализов и т.д. Если разделение включает 3-5 пиков, то нужно брать 50х4.6 колонку с мелким адсобентом зернения от 3-х микрон и ниже. При оптимальных условиях (исходя из максимума давления 200-250 атм.) разделение должно занимать не более 2-х минут.. средняя эффективность должна составлять 4000-8000 тарелок. |
|||||
|
aleksey_ksk Пользователь Ранг: 22 |
19.03.2010 // 18:53:30
Не, рецикл больше не практикую. Стараюсь быстро но с чистым. Изократика обычно, жаль что 2 канала, на 4х я бы практически все группы охватил, но пока универсально так получаются А-50/50 ACN/Me B-в основном 0.1% TFA около 2.2пш, или какой либо другой буфер, по обстоятельствам, в общем варьирую, главное чтобы был с 1 колонки и 2 растворов достаточный охват, многие вещества нормально выходят на разных буферах, некоторые только на определенных, от трудных ДВ и отталкиваюсь, достаточно экономно. Это позволяет загружать на ночь а днем другими делами заниматься. Это я расписывал в другой теме. Скоро в эту тему или в новую выложку результаты по 2.1 диаметр SymmetryShield RP8 и 18 |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
19.03.2010 // 19:02:13
Ну, своя рука владыка
|
| |
||
|
Ответов в этой теме: 26
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
