| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Методы ВЭЖХ >>>
|
 |
| Автор | Тема: Методы ВЭЖХ |
|
Люся Пользователь Ранг: 5 |
 19.03.2009 // 13:34:27
Уважаемые коллеги, если кто знает объясните влияние на время удерживания веществ триэтиламина и каков механизм этого влияния? Заранее благодарна |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1375 |
19.03.2009 // 16:26:36
Редактировано 1 раз(а) Уважаемая Люся, вопрос в том виде, каком Вы сформулировали предполагает очень развернутый ответ. Однако, если Вы его конкретизируете, то, возможно, получите ответ. Прошу Вас уточнить, фаза прямая или обратная, триэтиламин - в составе пробы или элюента, какой элюент используется или предполагается использовать, анализируемые вещества? |
|
Люся Пользователь Ранг: 5 |
20.03.2009 // 10:58:20
Большое спасибо за отклик! Фаза обращенка С18. Определяем веропамил в биопробах (моча и плазма крови). Воспроизводим методику, найденную в интернете без определенных ссылок на публикацию. При работе с биопробами проблема заключается в том, что у нас время удерживания должно быть около 10 минут, чтобы вышла биология. По найденной нами методике элюент содержит фосфатный буфер, который доводят о-фосфорный до рН2,1, а затем весь элюент подщелачивают именно триэтиламином до рН3,7. Мы не имея триэтиламина мы воспризвели рН элюента, но не имеем стабильного времени удерживания. Мне не очень понятны манипуляции с подкислением и подщелачиванием элюента, описанные в методике. Неужели вся проблема в триэтиламине? |
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
20.03.2009 // 15:40:15
Как правильно было сказано, долго и много объяснять придется. Для начала ознакомьтесь со статьей на этом же ресурсе: Потом воспользуйтесь поиском. Этот вопрос много и продуктивно обсуждался в нескольких темах. |
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1375 |
24.03.2009 // 9:37:14
Редактировано 3 раз(а) Веропамил - является третичным амином. Обратно-фазовые сорбенты всегда на своей поверхности содержат остаточные "кислые" силанольные группы, на которые "любят садиться" основные соединения и, в частности, амины. Увеличение ширины пика, большой хвост - одни из признаков такого взаимодействия. Чтобы уменьшить эти взаимодействия используют так называемые "end capрed" колонки, в которых эти силанольные группы дополнительно исчерпывающе силилируют. Но можно пойти другим путем, как в Вашем методе, добавив в элюент небольшое кол-во модификатора фазы - триэтиламина, который "закроет" остаточные силанольные группы. Отсюда видно, что использование триэтиламина (или любого аналогичного модификатора) для Вас обязательно. Кроме того, для воспроизводимости времен удерживания, помимо рН следует контролировать и содержание модификатора в элюенте. Для ион-парной хроматографии характерно "медленное" установление равновесия в колонке , что требует длительного предварительного промывания перед анализом. Следует также учитывать, что использование аминов в качестве модификаторов обратно-фазовых колонок часто необратимо изменяет их свойства - "end capрed"-эффект. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 4 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
