| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Вопросы по ВЭЖХ витаминов из растительного сырья >>>
|
 |
| Автор | Тема: Вопросы по ВЭЖХ витаминов из растительного сырья | ||
|
мом Пользователь Ранг: 296 |
 19.01.2009 // 18:34:48
День добрый. Вопросы по ВЭЖХ витаминов из растительного сырья Я понимаю что «наш» форум уже как библия уже содержит все ответ, но я не нашел, отнеситесь терпимо и скажите ссылку на тему (дату, страницу). При заколе водного экстракта из листьев, показалось небо в алмазах по количеству пиков (цитата коллеги), что делать. Я понимаю, что анализ водарастворимых витаминов в одном флаконе---задача не простая. Но с чего начать. По началу я обрадовался проколов стандарты Аск., Никат., Передок., Тиам., Риб., и наложив их на мою хроматогамму. Но позже прописав на разных длинах, вол я получил разное спектральное отношения, то есть это или неоднородные пики, либо вообще не те вещества и это просто со-элюирование. Так что сейчас я в тупике. Что попробовать дальше. Другой вопрос. Поправите меня если я пне прав, аскорбинка любит низкий pH а фолька pH за 8, что делать если мне нужно приготовить модельную смесь содержащую эти два компонента. При низком pH я не могу растворить толком фольку(приходится растворять при рН 7,5 и выше) если выводить рН позже до 2,5-3 фолька выпадает, что не так. Еще вопрос, в литературе нашел подвижная фаза 0,8% кислоты в воде на С-18, померил рН 1,42 , ограничение для прибора не ниже 2 что делать. Сделал на этой кислоте рН 2 и аск. вышла одним пиком в отличие от фазы 0,4М перхлорат где она выходит почти сразу(за мертвым объемом) да еще и «гребешком».можно ли опускается по рН ниже 2 и чем это чревато. |
||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|||
|
мом Пользователь Ранг: 296 |
19.01.2009 // 20:42:46
Редактировано 2 раз(а) Чёрт, увидел опечатку в заголовке,  извените.
|
||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1385 |
20.01.2009 // 9:18:38
Редактировано 4 раз(а) Достали с водорастворимыми витаминами... Пишем условия оригинального метода разделения С(2,3;254нм), PP(4,1;254нм), B3(6,2;204нм), B6(11,7;292нм),B1(15,5;254нм), B2(16,4;267нм), Bc(16,8;281нм), B12, H (перечислены в порядке элюирования, время выхода, длина волны детектора): колонка Luna 5u C18(2) 5мкм 150х2 Phenomenex; температура колонки - комнатная, 20-25С; Элюенты готовим разбавляя раствор 20мМ гексансульфоната Na в 0,025н H2SO4 ; элюент А - 20мМ гексансульфоната Na в 0,025н H2SO4 + ацетонитрил 1:1 v/v; элюент В - 10мМ гексансульфоната Na в в 0,025н H2SO4; градиент: 0-0,5мин 5%А 0,5-25мин (5->68)%А 25--25,5мин (68->5)%А кондиционирование - 20мин, 100%В; поток - 0,4мл/мин; объем петли - 5 мкл; общая продолжительность цикла - 60мин. Для стабилизации условий разделения необходим один полный холостой цикл. Пробоподготовка: измельченное растительное сырье 2г +2г 40мМ (возможно меньше) раствора аммиака озвучивают при 30-40С в течение 15мин. Смесь центрифугируют 20мин 4000 об/мин, супернатант фильтруют 0,45мкм, собирая 0,5-1мл фильтрата и хроматографируют. Удачи! |
||
|
мом Пользователь Ранг: 296 |
20.01.2009 // 15:34:32
Редактировано 1 раз(а) День добрый. Большое человеческое спасибо. Хотя не понятно по поводу со-элиирования Буду работать, разбератся. |
||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1385 |
20.01.2009 // 16:45:02
Никакого соэлюирования нет. Все витамины делятся до базовой. |
||
|
мом Пользователь Ранг: 296 |
21.01.2009 // 2:47:21
День добрый. Сделаю по вашей методе, она отличается, от той которой воспользовался я. Ещё раз спасибо. |
||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
||
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1385 |
21.01.2009 // 12:28:08
Хочу обратить внимание на необходимость предварительного одного холостого хроматографического цикла для стабилизации условий разделения и воспроизводимости времен удерживания. |
||
|
мом Пользователь Ранг: 296 |
21.01.2009 // 19:00:39
Спасибо учту. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 7 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]