Форумы ANCHEM.RU: Жидкосная хроматография, затянут конец пика

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Жидкосная хроматография, затянут конец пика >>>

  Ответов в этой теме: 26
  Страница: 1 2 3
  «« назад || далее »»

[ Ответ на тему ]

Lesenok
Пользователь
Ранг: 14

09.06.2008 // 14:54:58

Спасибо, попробую, если что то снова к Вам прийду

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Farma
Пользователь
Ранг: 382

09.06.2008 // 15:17:04

Lesenok пишет:
колнка была взята новая и ничего кроме стандарта ещё не кололось. С новой колонки при промывке ацетонитрилом лезли разные пики непонятной природы. Буфера не используем!

"Ну, это нормально", как говорил герой Машкова. С новой всегда всякая непрореагировавшая дрянь лезет. может, проблема в том, что Вы её в равновесие с подвижной фазой не привели? Попробуйте подольше уравновесить.

Волгин
VIP Member
Ранг: 1335

09.06.2008 // 15:57:32

Farma пишет:
... Тем более, Zorbax - очень хороший сорбент.

Вот по этому поводу позвольте рассказать древнюю историю. Как-то на одной из моих прежних работ

нужно было срочно послать тезисы на какую-то конференцию за бугор, чтобы начальник туда съездил. Взяли несколько колонок С8 и С18 и в одном и том же граиенте 10 - 90%ACN в 0.01% TFA прокололи смесь одних и тех же чистых пептидов и белков. После этого колонки тщательно отмыли и законсервировали. Где-то через год-полтора понадобилась колонка с Zorbax ODS. При промывке с нее тоже что-то безобразно лезло, а при тестировании также безобразно были затянуты пики. Как ни грустно, но такой же результат был с колонкой Vydac C18 300A специально предназначенной для пептидов и вышеуказанных условий... Возможно, Зорбаксы последующих поколений и лучше, но старые...

virtu
VIP Member
Ранг: 2136

09.06.2008 // 17:08:43

to Lesenok: если ВСЕ пики стандартной смеси так же будут "хвостить" - ищите "лишние мертвые объемы", может где-то плохо затянуто или деформация (колонку Вы же переставляли) и т.д. Проверьте кстати посткол. дериватизацию (просто уберите её и поставьте УФ на выход).
to Волгин: часть белков, наверно, просто необратимо "села", хотя такие предположения надо проверять сразу после использования сорбента.
to Farma: вряд ли, для этих сорбатов и в этом хром. режиме, если сорбент недоуровновешен - это будет основной причиной таких "хвостов".

Farma
Пользователь
Ранг: 382

09.06.2008 // 21:40:54

Волгин пишет:

Farma пишет:
... Тем более, Zorbax - очень хороший сорбент.
Вот по этому поводу позвольте рассказать древнюю историю. Как-то на одной из моих прежних работ нужно было срочно послать тезисы на какую-то конференцию за бугор, чтобы начальник туда съездил. Взяли несколько колонок С8 и С18 и в одном и том же граиенте 10 - 90%ACN в 0.01% TFA прокололи смесь одних и тех же чистых пептидов и белков. После этого колонки тщательно отмыли и законсервировали. Где-то через год-полтора понадобилась колонка с Zorbax ODS. При промывке с нее тоже что-то безобразно лезло, а при тестировании также безобразно были затянуты пики. Как ни грустно, но такой же результат был с колонкой Vydac C18 300A специально предназначенной для пептидов и вышеуказанных условий... Возможно, Зорбаксы последующих поколений и лучше, но старые...

История, конечно, поучительная

, но не надо забывать, что белки с большим трудом можно рассматривать в качестве тестовой смеси для обычной ODS колонки. Поэтому, результаты данного эксперимента лично мне ничего не говорят ни за, ни против Зорбакса. А вот насчёт Вудака - действительно интересная инфа...

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Ассоциация аналитических центров «Аналитика»
Ассоциация объединяет специалистов в области прикладной аналитической химии и работает под эгидой Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии Российской Федерации (Ростехрегулирование) и Научного Совета по аналитической химии РАН (НСАХ РАН). В Ассоциацию входит более 130 членов - лабораторий отраслевых и академических институтов, ВУЗов, организаций Ростехрегулирования, предприятий различных форм собственности.

Farma
Пользователь
Ранг: 382

09.06.2008 // 21:42:48

virtu пишет:
to Farma: вряд ли, для этих сорбатов и в этом хром. режиме, если сорбент недоуровновешен - это будет основной причиной таких "хвостов".

Так а кто его знает, что есть "основное", а что "побочное"

Не попробуешь - не узнаешь. А как раз данный момент проверить будет проще простого.


Ответов в этой теме: 26 Страница: 1 2 3 «« назад \|\| далее »»	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты