| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Буфер из декансульфоната натрия и дигидрофосфата натрия забил колонку >>>
|
 |
| Автор | Тема: Буфер из декансульфоната натрия и дигидрофосфата натрия забил колонку |
|
Xxx359xxX Пользователь Ранг: 3 |
 22.07.2026 // 12:44:55
Всем доброго времени суток, нужна помощь по вопросу с ион-парной хроматографией. Колонка Zorbax eclipse XDB-C8. Проводили фармакопейный анализ на атомоксетин. В методике для него указано, что необходим использовать буфер в состав которого входят декансульфонат натрия и дигидрофосфат. После 1 анализа выход примеси был 12минут, колонку промыли и звюаконсервировали в ацетонитриле. После этого на втором анализе время удерживание упало в два раза и количество аналитических тарелок уменьшилось. Колонка эндкепированная, мог ли декансульфонат образовать мицклы или же за счёт ионных взаимодействий с сорбентом загрязнить колонку? Буду благодарен, если кто-нибудь поможет. |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
vmu Пользователь Ранг: 1417 |
22.07.2026 // 20:37:40
Не зная мельчайших подробностей всех ваших действий, можно гадать до бесконечности. Помимо колонки, на время удерживания влияют состав элюента (могли во второй раз просто не так приготовить; или использовали испортившуюся старую ПФ), скорость потока и температура (вопросы к хроматографу). Колонка могла испортиться анализируемыми пробами после первого анализа. Как вы колонку мыли? Сразу 100 % ацетонитрила, не вымыв из нее буфер водным элюентом? Как долго хранилась колонка? Какого качества реактивы используете? Сколько хроматограмм получили во втором испытании? Времена в серии последовательных хроматограмм повторяются нормально? Требования ППХС из методики выполняются? О какой примеси речь? Другие вещества удерживаются как? Сама по себе ион-парная ПФ в методике без особенностей, какого-то старшного загрязнения она давать не должна. Декансульфонат взаимодействует с сорбентом за счет гидрофобных взаимодействий, а с атомоксетином и другими аминами - за счет ионных. |
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1389 |
23.07.2026 // 0:57:54
Возможно, Вам не следовало промывать и "консервировать" колонку ацетонитрилом. Для ион-парной хроматографии характерно медленное установление равновесия поверхность сорбента - подвижная фаза. Часто это занимает не менее 1 - 2 часов. Возможно, что при первом использовании равновесие вообще не было достигнуто. Промывка ACN резко нарушила полученное равновесие. Установление равновесия часто можно отследить по появлению пика в конце промывки (~210 нм). |
|
Xxx359xxX Пользователь Ранг: 3 |
23.07.2026 // 9:06:52
Да, я понимаю. Я промывал 8 часов подвижной фазе ее. Если последовательно, то я промыл ее в первый раз, прогнал пару часов подвижной фазой, время удерживания увеличилось ближе к тому, которое должно быть. Затем на следу. Ший день я продолжил проливать подвижной фазой, плюс на ночь колонка была законсервирована в пф с ацетонитрилом(но его мало было совсем). И на следующий день после доп промывки подвижной фазой она опять вернулась к исходным показателям. Я не понимаю почему так, у меня догадка что или фаза коллапсирует в этой пф или сам декансульфонат забивает поры колонки. |
|
Xxx359xxX Пользователь Ранг: 3 |
23.07.2026 // 9:14:56
С колонкой работал другой оператор, около 4 месяцев назад. У нее получилось получить пик атомоксетина на 12 минуте. После анализа на примеси, она помыла колонку и законсервировала в ацетонитриле, мыла подвижкой и потом водой с ацетонитрилом. После этого колонку взяли мы и пробовали повторить этот анализ, в результате чего получили время удерживания 6 минут. Анализ переделывали несколько раз и разные люди у всех 6 минут получается. Решили почистить колонку, промывали водой с ацетонитрилом и ипсом с ацетонитрилом. Затем промывали подвижной фазой несколько часов, время удерживания увеличилось ближе к 12. Затем продолжили промывать подвижной фазой, после чего время удерживания упало назад до 6. Реактивы используем качественные, промывали не сразу ацетонитрилом, буфер был удален, ППХС выполняется, примесь Е по моему. Но у нас сам атомоксетин не удерживается даже как должен. Мы сейчас чисто его пробу вкалываем для опоеления. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 4 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]