| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Мониторинг процесса гидролиза жировой фазы методом ВЭЖХ >>>
|
 |
| Автор | Тема: Мониторинг процесса гидролиза жировой фазы методом ВЭЖХ |
|
Ivnschweppes Пользователь Ранг: 1 |
 28.11.2025 // 8:42:17
Коллеги, добрый день! Обращаюсь к сообществу за консультацией по методикам хроматографического анализа. В рамках нашего исследования стоит задача мониторинга ферментативного гидролиза триглицеридов. В качестве основного метода рассматриваем высокоэффективную жидкостную хроматографию. Буду благодарен за рекомендации по следующим пунктам: Апробированные методики. Есть ли у кого-то опыт работы с готовыми методиками или публикациями, в которых детально описан количественный анализ всех продуктов липолиза — от исходных триглицеридов до конечных свободных жирных кислот (СЖК) — в рамках одного хроматографического анализа? Интересуют как стандартные протоколы, так и возможные модификации. Выбор хроматографической колонки. Какой тип колонки показал себя наиболее эффективным для одновременного разделения такой сложной смеси, содержащей триглицериды, диглицериды, моноглицериды и СЖК? Рассматриваем в первую очередь обращенно-фазовые колонки (C18, C8), но открыты к предложениям. Оптимизация условий элюирования. Какие параметры подвижной фазы (состав градиента, скорость потока) позволяют добиться качественного разделения всех целевых компонентов без значительного ухудшения формы пиков, особенно для СЖК? Есть ли особенности в подготовке проб для предотвращения наложения пиков? Заранее признателен за любой обмен опытом и ссылки на релевантные литературные источники или практические наработки. |
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|
OldBrave VIP Member Ранг: 1378 |
28.11.2025 // 23:30:01
Редактировано 2 раз(а) На сегодня нет решения Вашей задачи "за один проход". СЖК следует в Вашем случае анализировать ГЖХ в виде метиловых эфиров, которые придется получать в кислой среде. Анализ смеси MAG, DAG и TAG можно провести ВЭЖХ. Однако следует учитывать, что разделение происходит по ECN, а значит компоненты с одинаковым ECN разделены не будут. Наилучшие результаты были получены в следующих условиях (ссылка на форум обязательна): хроматограф Shimadzu Prominence Метод: TAG ELSD abs 20-100-1 анализ.lcm Колонка: Ultracarb 3u ODS (20) 150 mm x 4.6 mm; Ткол.: 25С, поток: 1,0 мл/мин, петля: 5 мкл; Проба: ~10 мкг/мл ац.; Valve(колонка) = 1; Valve(детектор) = 2 (ELSD); Элюенты: А - ACN, D - ACN-EtOH-ац.-гекс. (30:20:30:20); Градиент: 20% D -> 100% D (60 мин, кривизна -1), 100% D (15 мин); Начальное кондиц.: 15 мин; ELSD: 40C, 3,50 kPa, GAIN 3, фильтр 2s; Сбор данных: 2 Гц (500 мс); Условия позволяют разделить компоненты с ECN (8,00 - 64,00). Получите красивую картинку, дальше - идентификация. Для калибровки потребуются стандарты MAG, DAG и TAG (с четными ECN 12 -> 64, LnLnLn, LLL, OOO). Получить зависимости: ECN = f(T) и T = f(ECN). Функция составная, стык при ECN=28,0. Если преодолеете этап идентификации, - добро пожаловать в количественное определение, поскольку отклик ELCD - нелинейный. Однако, есть оригинальное решение. Удачи! |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 1 |
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
