Форумы ANCHEM.RU: Zorbax NH2

Российский химико-аналитический портал

химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов

карта портала ::: расширенный поиск

ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ...

Форум химиков-аналитиков, аналитическая химия и химический анализ.

Zorbax NH2 >>>

Ответов в этой теме: 7

[ Ответ на тему ]

Автор

Тема: Zorbax NH2

yyyvvvrrr
Пользователь
Ранг: 17

24.04.2017 // 17:52:55

Доброго времени суток!
Передо лабораторией встала задача разделения сахаров (глюкоза, галактоза, манноза и др.) на ВЭЖХ. Насколько я понимаю, для этих целей можно использовать колонку Zorbax NH2, а подвижной фазой является ацетонитрил + вода. Проблема в том, что при прокачивании через колонку (Zorbax NH2) подвижной фазы, содержащей воду, детектор ELSD регистрирует шум, и весьма интенсивный, как будто из колонки что-то вымывается. В связи с этим вопрос: что не так с колонкой и что с ней можно сделать?

ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

24.04.2017 // 20:20:44

Используйте Zorbax Carbohydrates или HiPlex Ca с таким крутым детектором.

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

24.04.2017 // 23:47:35

И у вас что-то плохолетучее в воде, попробуйте более чистую воду. Или без колонки все работает нормально? Отмывайте ее.

yyyvvvrrr
Пользователь
Ранг: 17

26.04.2017 // 12:03:22

Спасибо за совет, проверка воды ничего не дала - вода чистая, колонка с другой подвижной фазой (метанол:ацетонитрил) ведет себя хорошо, но при добавлении воды сигнал ELSD все так же зашкаливает. Видимо придется использовать колонку Hi-Plex H.

SergeyK
Пользователь
Ранг: 2168

26.04.2017 // 17:20:41

yyyvvvrrr пишет:
Спасибо за совет, проверка воды ничего не дала - вода чистая, колонка с другой подвижной фазой (метанол:ацетонитрил) ведет себя хорошо, но при добавлении воды сигнал ELSD все так же зашкаливает. Видимо придется использовать колонку Hi-Plex H.

Отлично, колонку и воду исключили, разберитесь с режимом работы детектора, он должен работать с водой.

Алексей (СамГУ)
Пользователь
Ранг: 367

27.04.2017 // 10:47:13

Редактировано 1 раз(а)

Поскольку имею опыт работы с данным детектором ELSD (Agilent) ... я согласен с SergeyK , надо проверить работу детектора, т.е. убрать колонку, соединить насос капилляром с детектором и сделать поверку детектора на предмет приемлемого шума, воспроизводимости и т.д. в стандартных условиях. Если все оК! (в чем я сомневаюсь почему-то ...), подобрать условия работы детектора под ваши вещества (Google в помощь). А вообще я бы не заморачивался с вашими аналитами и ELSD детектором (капризный он, малый участок линейности при калибровке... его используют в крайнем случае, когда нужна бОльшая чувствительность и градиентное элюирование). Ваша задача решается на данной колонке в изократике (если постараться, можно аккуратно подобрать процент ацетонитрила , здесь бывает , что изменение плюс минус на 1% многое решает) и рефрактометрическим детектором. Я так определял смеси глицерин, сорбитол, сахароза, фруктоза и манноза. Удачи! ... Был случай, когда использовали ELSD детектор с вода-ацетонитрил ПФ и потом 2 месяца не использовали, т.е. не законсервировали как положено с промывкой ацетоном и отдувкой его из детектора, потом начали работать и ... отгребаем большой шум, всплески, флуктуацию нулевой ... потом были долгие "танцы с бубном" по отмывке , продувке , "прожарке" и т.д. по инструкции, ... и после нескольких дней все же привели детектор в чувства, теперь все делаем как положено и ацетона, азота не жалеем на консервацию)) ... Не знаю, .. возможно вам это тоже предстоит. Чистота азота (главным образом отсутствие частиц), тоже помогает иногда ...

Каталог ANCHEM.RU
Администрация
Ранг: 246

Испытательный центр ФГУ «Балтийская дирекция по техническому обеспечению надзора на море»
Федеральное государственное учреждение «Балтийская дирекция по техническому обеспечению надзора на море» создано в соответствии с распоряжением Правительства Российской Федерации и осуществляет свою деятельность на территории Российской Федерации, во внутренних морских водах, территориальном море, в исключительной экономической зоне и на континентальном шельфе Российской Федерации.

virtu
VIP Member
Ранг: 2136

27.04.2017 // 11:16:58

yyyvvvrrr пишет:
Проблема в том, что при прокачивании через колонку (Zorbax NH2) подвижной фазы, содержащей воду, детектор ELSD регистрирует шум, и весьма интенсивный, как будто из колонки что-то вымывается.

Это не шум растёт, а фон и это нормально. Попробуйте оптимизировать настройки ELSD, в первую очередь, надо уменьшить усиление (attenuation), плюс надо оптимизировать и другие параметры (поток газа, температуры и т.д.). ELSD очень чувствителен к механическим примесям, это касается и газа и элюента, поэтому, рекомендую поставить, если не стоят, фильтры на газ (менее 0.1 um) и на колонку (0.2 - 0.5 um). Плюс можно фильтровать предварительно воду/буфер через 0.2 um. ELSD действительно существенно капризней RID и, если есть возможность (в том числе, если чувствительности RID достаточно), проще использовать последний для решения текущей задачи.

yyyvvvrrr
Пользователь
Ранг: 17

27.04.2017 // 16:25:18

Сделать поверку детектора хорошая идея, но сейчас на это совершенно нет времени, к тому же другая колонка - Hi-Plex Ca, ПФ для которой является вода при работе с ELSD не вызывает роста фона. Думаю, действительно, нужно разбираться с настройками ELSD для определенного метода и колонки. Насчет RID, я бы и рад с ним поработать, но к сожалению есть только ELSD, DAD и MS.


Ответов в этой теме: 7	Ответ на тему

ПОСЛЕДНИЕ НОВОСТИ ANCHEM.RU: [ Все новости ]

Размещение рекламы / Контакты