| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Высокое давление на ВЭЖХ-колонке >>>
|
 |
| Автор | Тема: Высокое давление на ВЭЖХ-колонке | |||||
|
efz Пользователь Ранг: 13 |
 05.01.2010 // 11:00:58
Колонка - Lichrosorb NH2, 250 х 4,6 мм, с размером частиц 5 мкм Детектор - рефрактометрический ПФ - вода. Ситуация странная - колонка была новая, когда стали апробировать на ней методику, и не получили нужной эффективности (д.б. не менее 1500, мы же получили - около 700). Решили проверить колонку на другом приборе, отправили в Москву (только там была возможность это сделать), на другом приборе получили замечательные хроматограммы (число ТТ - 2500). Привезли колонку обратно, поставили - получили ТТ - 400. Честно, я в шоке... Посоветовали перевернуть колонку, что я и сделала, результат - высокое давление. При чем, когда я переворачиваю колонку, где-то 1 мин. давление в норме, а потом резко возрастает. Снова переворачиваю - и опять такая же история. Что делать? |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
olmail Пользователь Ранг: 112 |
05.01.2010 // 12:39:46
Редактировано 1 раз(а) А по-подробнее можно? Что за прибор, чем отличается от московского, что определяете в таких условиях? Вы уверены, что Lichrosorb NH2 держит чистую воду? Нормальное давление какое и до какого уровня растет? |
|||||
|
Prolabor Пользователь Ранг: 583 |
05.01.2010 // 14:36:25
Там (в Москве) тоже ПФ была вода? Попробуйте добавить в элюент 1-5% ацетонитрила. Если, конечно, это не скажется катастрофически на разделении определяемых Вами аналитов (кстати что разделяете?). |
|||||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
05.01.2010 // 22:23:19
1) 1500 тт вполне может быть написано "от балды". ТИакже возможно что это было когда то , на незагаженной и не подсевшей колонке. Наконец у Вас могут просто быть большие мертвые объемы. 2) Вполне возможно что колонку "передавили " и сорбент крошится, забивая фильтр. Кстати "целая минута" говорит о том что в вашей системе может быть большой мертвый объем до колонки, при включении насоса на коротких соединениях давление набирается за 30-40 секунд ( тоже не моментально). |
|||||
|
Prolabor Пользователь Ранг: 583 |
05.01.2010 // 22:50:04
DSP007, поддерживаю... Мне тоже кажется дело в вязкости воды и мертвых объемах системы. Вода как элюент - это слишком сурово  |
|||||
|
efz Пользователь Ранг: 13 |
06.01.2010 // 10:33:52
У меня прибор - Agilent 1200. в Москве был Woters Briz (не уверена что правильно пишу, но думаю, вы поймете). Определяем количественное содержание вещества - Холинальфосцерат (это субстанция для производства лекарственого препарата). Колонка рекомендована разработчиком методики, более того, мы не первые, такая методика уже прописана, в ней так же рекомендована колонка этой марки. Нормальное рабочее давление 60 (так и было, пока я не перевернула колонку, дернул же меня нечистый), растет до 250, дальше прибор отключается. |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
efz Пользователь Ранг: 13 |
06.01.2010 // 10:39:52
Если колонку "передавили" - все, сделать ничего нельзя? И как избавляться от больших мертвых объемов? Я знаю, что должны быть как можно более короткие соединения, я постаралась это сделать, но изменений не заметила... |
|||||
|
Prolabor Пользователь Ранг: 583 |
07.01.2010 // 0:21:03
1. В методике прописана в качестве элюента (ПФ) чистая вода? без добавок? 2. В Москве на Waters тоже использовали чистую воду в качестве элюента (ПФ) и этот же аналит для получения количества ТТ? 3. В методике, случаем, не прописана установка предколонки? и ее замена при нарастании давления в системе при анализе реальных образцов. |
|||||
|
efz Пользователь Ранг: 13 |
07.01.2010 // 9:04:33
1. Да, в методике прописана чистая вода. Но я эксперементировала - добавляла процентов 5 ацетонитрила. Эффективность колонки не выросла. А делить мне там собственно нечего, там один пик этого холина.... 2. В Москве думаю использовали чистую воду, хотя 100% гарантию конечно же дать не могу. Аналит - другой, не тот что у меня. |
|||||
|
efz Пользователь Ранг: 13 |
07.01.2010 // 9:30:22
3. В методике предколонка не прописана. Здесь вообще интересно. У меня стояла предколонка С18, я ее не убрала, работала сначала с ней. Потом заказала родную для этой колонки, т.к. было низкое значение ТТ и я подумала, что дело возможно в не родной предколонке, когда пришла, заменила С18, число ТТ упало с 400 до 200. Вернула С18 - вернулось чило ТТ. Я если честно, очень плохо знаю рефрактометрический детектор. Более того он не наш, нам его дали во временное пользование, этот детектор ни один нормальный инженер не смотрел и не настраивал. Еще проблема, у нас есть служба поддержки Agilent, но они также никто не знают этот детектор, отправляют нас в Москву, а там такие деньги просят.... Вообще может быть проблема в детекторе? Я вообще планировала раствор одного и того же вещества на этой колонке посмотреть на СФ-детекторе и на рефрактометрическом, но вот забила колонку, так жаль... если придется покупать новую, мне точно прилетит от начальства((( |
|||||
|
Prolabor Пользователь Ранг: 583 |
07.01.2010 // 10:14:32
Вот и ответ на вопрос почему другое количество ТТ. Что касается детектора. В общем случае детектор не влияет на эффективность. Если конечно не происходит дополнительного размытия в камере детектора (но тогда вы получите не просто уширение пика, а размытие заднего фронта). Вы определяете содержание аналита в чем (матрица)? Что содержит раствор, который Вы вводите в хроматограф? Опишите все стадии методики (пошагово) перед вводом в хроматограф. Попробуем разобраться. Вы пробовали добавлять ацетонитрил после того как колонка "забилась"? |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 46
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]
