| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
О сложных взаимоотношениях холестерола и ВЭЖХ >>>
|
 |
|
Dionisii Пользователь Ранг: 377 |
 13.05.2004 // 15:11:58
Если все будет нормально - уже в сентябре буду аспирантом НИИ Фармакологии. В Москве буду уже в июле - у меня вступительные экзамены в первых числах. |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
Dionisii Пользователь Ранг: 377 |
17.05.2004 // 10:22:43
Кстати, народ, по поводу холестерола возник еще один вопрос. В ацетонитриле он растворяется из рук вон плохо, приходится растворять пробу в смеси метанола с чем то более гидрофобным - к примеру с изопропанолом. Причем, если изопропанола мало, а ацетонитрила много, начинает выпадать восадок в виде кристаллов. Так вот собственно, в чем вопрос: если элюент у нас ацетонитрил с водой, то есть вещь достаточно гидрофильная, и мы вводим в эту среду пробу, не произойдет ли то же самое (выпадение осадка) внутри системы. К примеру, не случится ли необратимая сорбция на колонке? |
|||||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
17.05.2004 // 15:02:38
Редактировано 1 раз(а) Если проба гомогенна, то бояться, что попав в колонку она тут же "высыпется" - не стоит. Там моментально происходит порядочное ее разбавление уже в начале колонки. Тем не менее, вводить пробу в более сильном элюенте, чем тот, что используется для анализа - обычно не рекомендуют ввиду того, что при этом велика вероятность появления артефактов на хроматограмме, проявляющихся в виде одного или нескольких отрицательных пиков вакансий. Именно по этой причине ранее я и рекомендовал часть ацетонитрила заменить на изопропанол, а падение удерживания компенсировать добавкой перхлората лития. Он выполняет кроме всего прочего еще одну важную функцию, - не дает "расплываться" и "лохматиться" пришитым алкильным группам в сильно неполярных элюентах, о чем уже говорил Костя. Думаю, если взять ИПС, ацетонитрил и 0,2М раствор перхлората в соотношении примерно 20:70:10, то должно кое что получиться. Пробу растворять нужно тоже в том же элюенте. Можно попробовать взять короткоцепочную пришивку (даже нитрил), там можно будет применить не столь неполярные элюенты, но растворимость пробы еще уменьшится. Восстановить растворимость можно добавкой в элюент в качестве модификатора децила ПАВ (чаще неионогенных), например тритон Х80 или твин. Но на новой и дорогой колонке с ПАВ экспериментировать не советую. Это проще и безопасней сделать на плохонькой, которую не жалко. |
|||||
|
Dionisii Пользователь Ранг: 377 |
19.05.2004 // 8:15:17
Редактировано 1 раз(а) user wiped their message |
|||||
|
Dionisii Пользователь Ранг: 377 |
19.05.2004 // 8:15:25
Редактировано 1 раз(а) user wiped their message |
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
Dionisii Пользователь Ранг: 377 |
19.05.2004 // 10:51:46
Никто не в курсе, какая в среднем концентрация холестерола в сливочном масле? Надо ли его специально концентрировать и подвергать жестокой пробоподготовке, а то может быть можно просто так его кольнуть? |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
20.05.2004 // 17:07:15
Форум не застыл, просто все отдыхают  Я временно переместился на форум LC*GC 
|
|||||
|
Andrew VIP Member Ранг: 1373 |
20.05.2004 // 17:09:11
А где Етот форум? |
|||||
|
Наташа20 Пользователь Ранг: 1 |
28.03.2006 // 15:20:01
Может кто-нибудь поможет ?!! Нужна стандартизированная методика анализа холестерина методом ВЭЖХ и какими другими методами контролируется качество холестерина в продуктах, только если можно поподробнее. |
|||||
|
КонстантинС VIP Member Ранг: 2306 |
28.03.2006 // 16:47:16
Стандартизованная кем? Все-таки стероиды лучше делать газовой, после гидролиза. Можно колоть и так, но желательно просилилировать (поправьте меня, газовые хроматографисты, если глупость сказал). А ВЭЖХ кажется не очень подходящим методом. Вот, по-моему, наиболее дельный совет: "Предлагаю использовать следующие условия: колонка С18, температура 35-40 град., подвижная фаза изопропанол - ацетонитрил приблизительно(30:70), детектор УФ 210 нм (холестирин содержит двойную связь).Главное, чтобы растворители были чистые! С составом элюента придется поиграться. При таких же условиях успешно делил триглицериды и тяжелые углеводороды (детек. рефрактометр). В принцыпе по гидрофобности они где-то близко." Я бы грел сильнее, до 40-50. Растворители нужны оч чистые. Применять рефрактометр, или (если ничего не видно) УФ на 200-205 нм - все зависит от того что за прибор. Гидролиз действительно не повредит. Можно экстрагнуть хлористым метиленом, почистить через силикагель, в токе азота отогнать растворитель и остаток попытаться перерастворить в элюенте. Если это выходит плохо, то смесью элюента и , допустим, ТГФ. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 32
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]