| Российский химико-аналитический
портал |
химический анализ и аналитическая химия в фокусе внимания ::: портал химиков-аналитиков ::: выбор профессионалов |
 |
|
| ANCHEM.RU » Форумы » 1. Аналитический форум ... |
 |
Феномен в HPLC - увеличение площади пика при ументшении потока >>>
|
 |
| Автор | Тема: Феномен в HPLC - увеличение площади пика при ументшении потока | |||||
|
leshich Пользователь Ранг: 69 |
 11.01.2007 // 11:32:34
Редактировано 1 раз(а) Случайно обнаружил, кто поможет объяснить - при уменьшении потока в 2 раза площадь пика в 2 раза увеличивается: 0,5 мл/мин - 1200 MAu*s, 1,0 мл/мин - 600 MAu*s, 2,0 мл/мин - 300 MAu*s, Одна проба, одни элюенты (ацетонитрил и фосфорка), закалываются в одной последовательности. Колонка Phenomenex Gemini C18, DAD детектор, 329 нм, определяю розмариновую кислоту. Эффект наблюдается как в стандарте, так и в пробе. Заранее благодарен. P.S. прошу прощения за очепятку в названии, к сожалению, нельзя отредактировать. ументшении = уменьшении |
|||||
|
ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
||||||
|
_Xenofil Пользователь Ранг: 414 |
11.01.2007 // 11:37:07
Редактировано 1 раз(а) |
|||||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
11.01.2007 // 11:44:19
Редактировано 1 раз(а) А что здесь феноменального?  У Вас типичный концентрационный детектор. Вне зависимости от потока поглощение будет одинаковым при выходе из колонки данной концентрации вещества. А вот за счет потока Вы получаете ровно в два раза более растянутый (или сжатый) пик. Соответственно и площадь. Обратите внимание на размерность площади (мВ*с) и то, что для вымывания данного вещества из колонки нужен некий фиксированный объем элюента. Если бы площадь имела размерность мВ*мл, то была бы одинаковой при разных скоростях потока. Это в ГХ на ионизационных детекторах сигнал зависит от скорости попадания вещества в детектор. А на катарометре и в ГХ будет ровно та же фигня. |
|||||
|
_Xenofil Пользователь Ранг: 414 |
11.01.2007 // 12:00:33
Вот-вот, я почти то же самое (и теми же словами) хотел сказать. Но что-то застеснялся. Ну не работал я на жидкостниках. В вашем исполнении и цена совета другая. |
|||||
|
leshich Пользователь Ранг: 69 |
11.01.2007 // 12:04:29
Редактировано 1 раз(а) Наверно я тупой, но мне это не понятно. Я всегда считал, что площадь пика зависит от концентрации вещества, а не от скорости потока. То, что пик становится шире с уменьшением скорости - это мне понятно, но он при этом должен становиться и ниже, то есть площадь должна оставаться примерно одинаковой, не так ли? В моем случае - нет, хотя в измеряемом диапазоне концентраций зависимость площади от концентрации - линейная. Я попробую для наглядности расширить первоначальную табличку: Скорость,мл/мин-Площадь,MAu*s-Высота,MAu- Ширина,s 0,5 мл/мин - 1200 MAu*s, - 150 - 12 1,0 мл/мин - 600 MAu*s, - 100 - 9 2,0 мл/мин - 300 MAu*s, - 60 - 7,5 |
|||||
|
leshich Пользователь Ранг: 69 |
11.01.2007 // 12:08:15
Упс, продолжение объяснения про размерность только сейчас заметил. Буду подумать 
|
|||||
|
Каталог ANCHEM.RU Администрация Ранг: 246 |
|
|||||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
11.01.2007 // 12:11:05
Редактировано 1 раз(а) Уважаемый Leshich Вы не правы - от концетрации зависит высота пика, а уже произведение высоты на ширину дает нам площадь пика. По оси Х прибор откладывает величину сигнала, а по У ( длине ленты)- время в секундах. Вспомните геометрию , 5 класс. То есть если у Вас из колонки вышла капля вещества с концентрацией условно 1 мкг/мл, дающая оптическую плотность в кювете 0,1 D и сигнал 100 мV, то пока эта капля не вымоется из кюветы у Вас высота пика будет соответствовать 100 mV. А вымоется эта капля условно говоря при потоке 0,5 мл за 2 секунды, при потоке 1 мл за 1 секунду, при потоке 2 мл -за 0,5 секунды. Хочу сразу заметить , что для мелких пиков и на "горбе" соответствие не такое точное, так как интегратор считает площадь пика по определенному алгоритму вычитая фон. |
|||||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
11.01.2007 // 12:12:45
Нет. Не так! С какого такого перепугу высота пика должна стать меньше? Если концентрация вещества на выходе из колонки одинакова, то и его поглощение будет одинаково вне зависимости от скорости потока. А то, что площадь пика пропорциональна концентрации справедливо только при одинаковых условиях эксперимента. Опять же в чем мерять площадь (см. дополнение к моему первому посту). |
|||||
|
leshich Пользователь Ранг: 69 |
11.01.2007 // 12:15:07
Редактировано 1 раз(а) Ок, то есть площадь пика нам не важна, а концентрацию мы определяем только по высоте пика? Сейчас будут рушиться все основы моего мировоззрения
|
|||||
|
DSP007 VIP Member Ранг: 2228 |
11.01.2007 // 12:18:46
Редактировано 1 раз(а) Нет наоборот! Площадь пика для нас важнее. Скорость то потока у нас во время анализа постоянная, а площадь пика от случайных причин у нас варьирует намного меньше чем высота. Всегда считайте только по площадям. |
|||||
|
Леонид VIP Member Ранг: 5266 |
11.01.2007 // 12:22:26
Ок, то есть площадь пика нам не важна, а концентрацию мы определяем только по высоте пика? Сейчас будут рушиться все основы моего мировоззрения Не-е-е... Не нужно путать святое с грешным. При одинаковых условиях ширина пика (в мВ*С) будет зависеть не только от скорости потока (для всех пиков - одинаково), но и от уширения пика, а также его асимметрии (для всех пиков - по разному). Именно поэтому используют площадь, а не высоту. Хотя в некоторых случаях (метод добавок) можно использовать и высоты, как меру концентрации вещества. Но обязательно для одного и того же компонента, поскольку уширение и форма пика для них при правильно подобранных условиях будут идентичны и алгебраически сокращаются по правилу подобия фигур. |
| |
||
|
Ответов в этой теме: 29
|
||
| ЖУРНАЛ | ЛАБОРАТОРИИ | ЛИТЕРАТУРА | ОБОРУДОВАНИЕ | РАБОТА | КАЛЕНДАРЬ | ФОРУМ |
| Copyright © 2002-2022 «Аналитика-Мир профессионалов» |
|
Размещение рекламы / Контакты |
[]